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【29】眼镜蛇毒短链神经毒素变异群杀案
江洋停留在每个人脸上的时间不过比平时延长数秒,但是平日的友谊骤然消失,每个人警惕地突然保持身体距离,眼中加载了防备的软件。
可怕的沉默。
易老建议先各自忙各自的研究。
众人依次散开,但是,明显的,离开门时,每人之间的距离加大,不再彼此说话。
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该村紧挨的一所二类医学院附属医院突然一夜之间肿瘤科数半病人骤亡。
那位主任着火般报告医疗司,司长把火传给江洋,江洋揉着一夜转悠易医病院而熬红的眼睛,在老院长那里混了一杯上等咖啡,借此打起精神,在喝着咖啡时,他就依着窗,思考着各种可能性。
弦般冲去。
肿瘤科主任,眼镜耷拉着,脸色蜡黄,双手不停搓来搓去,围着江洋转圈,说话时,脸凑进,因为害怕而抽搐的五官,看的江洋直后退。
听完那主任没有主题和顺序的介绍,江洋终于忍耐不住,摆手示意他不要再说了,把病例全部给他,助手屠辺,这位从事法医后,给自己改的名字,父姓真是成就他。
那厢已经将病人移进解剖室。
病例翻看中,江洋突然发现一个规律:全是使用蛇毒神经毒素用于镇痛的病例,临床应用安全性有问题?还是病人个体反应过敏?如果是反应过敏,为何全部病人中招?挨个甄查别的病人详细实验室检查,还活着的都没有使用蛇毒神经毒素。
地理位置较偏远的易医病院蛇类研究所,眼睛蛇原产地为:鋈翳。
将新捕的眼镜蛇,采集神经毒素,分离。
仓鼠,使感染伤寒沙门式细菌,在异常温度下,引起营养缺陷型突变株,病变病理同癌症。
取突变珠TA97,TA98,TA100,TA102,2-氨基芴(2-AF)、9-芴酮(9-Fluorenone)、1,8-二羟蒽醌(1,8-Dan)、丝裂霉素C(MMC)、MEM培养液、;HepesS9Sp-Sephadex;C-25和Superdex-75产品;环磷酰胺(CP)、叠氮化钠(NaN3)和其他试剂为分析纯。
S9混合液,每10ML成分为:;;;G-6-;NADP(70%)42MG;注射用水;
用5G眼镜蛇毒于20ML;醋酸氨缓冲液()中,80摄氏度水浴加热10MIN;10000G离心10MIN;上清液上SP-SEPHADEXC-25层析柱,(5CM※60CM);0~直线梯度洗脱。
神经毒组分经过浓缩上SURERDEX-75分子筛层析柱(※60CM);用含醋酸氨酸缓冲液()洗脱。
神经毒组分再上RESOURCIS离子交换层析柱,最后上HPLCN*AC18柱。
纯化的短链神经毒素为SDS-PAGE电泳纯。
Ames试验用TA97;TA98;TA100;TA102菌株,采用平板掺入法试验。
分别在加与不加S9两种条件下进行测试。
通过预实验,发现神经毒素开始抑制菌生长的浓度大于。
Ames试验共设六个样品剂量组,使细菌培养液中神经毒素的终浓度分别为:、、、、、;并设阴性对照组(生理盐水)、S9对照组和5个阴性对照组(2-氨基芴、9-芴酮、1,8-二羟蒽醌、丝裂霉素C和叠氮化钠)。
每组每个菌株三个平皿,在相同条件下重复三次。
回复实验评定标准:超过回复突变2倍(包括二倍)设定为阴性;低于自然突变率与神经毒素的浓度不呈线性关系。
细胞增殖抑制试验
直接法和代谢活化法都未出现神经毒素抑制CHL细胞增殖的毒性。
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